@PHDTHESIS{ 2019:1992976572, title = {Perfil fenotípico de cepas típicas e recombinantes de Toxoplasma gondii (Nicolle & Manceaux, 1909) isoladas de animais de produção : infectividade, cistogênese e relação com a virulência molecular}, year = {2019}, url = "http://www.tede2.ufrpe.br:8080/tede2/handle/tede2/8143", abstract = "Toxoplasma gondii é um protozoário intracelular obrigatório que apresenta ciclo lítico compreendido das etapas de reconhecimento, penetração, multiplicação, podendo sair da célula hospedeira ou evadir a reposta imune pelo mecanismo de encistamento, permanecendo no meio intracelular. Essas etapas influenciam na capacidade de infecção do parasito, relacionando-se com sua infectividade e, consequentemente, sua virulência. Esse trabalho visa caracterizar fenotipicamente isolados de T. gondii obtidos de tecidos de animais de produção de Alagoas, Brasil, sob o aspecto da infectividade (invasão e proliferação) e latência induzida no modelo in vitro. As provas de caracterização do comportamento biológico in vitro utilizadas foram: capacidade de conversão taquizoíto/bradizoíto, taxa de invasão e prova de proliferação. O primeiro experimento avaliou a eficiência de taquizoítos em alterar o metabolismo para o estágio de bradizoítos e foi conduzida por meio da indução por estresse exógeno (meio com pH alcalino). O teste de invasão avaliou a capacidade de penetração dos isolados em três tempos: 2h, 6h e 48h. E, por fim, a proliferação que consistiu em verificar a capacidade de multiplicação dos isolados em cultivo celular mensurado por real-time PCR. No primeiro experimento, isolados de T. gondii associados a abortamento em pequenos ruminantes e classificados como genótipo II (TgGtBrAL01, TgGtBrAL02, TgShSp1 e ME49) foram submetidos a todas as avaliações anteriormente descritas. O isolado TgShSp1 apresentou maior taxa de encistamento e menores taxas de invasão e proliferação e foi considerado de baixa infectividade. Os isolados TgGtBrAL01 e TgGtBrAL02, provenientes de um mesmo surto de abortamento em cabras, diferiram apenas na formação de cistos e apresentaram o perfil fenotípico similar nas outras provas. No segundo experimento, foi avaliada a capacidade de conversão taquizoíto-bradizoíto dos isolados de genótipo recombinante TgCkBrAL01 (#277) e TgCkBrAL03 (#114) provenientes de tecidos de galinhas; TgPigBrAL01, TgPigBrAL02 e TgPigBrAL03 (todos #114), isolados de suínos e cepas de clonais RH (tipo I) e ME49 (tipo II). Verificaram-se diferenças nas respostas de formação de cistos de isolados de genótipo recombinantes em comparação aos genótipos típicos, tendo como consequência um aumento na formação de vacúolos e diminuição das placas de lise. Ainda foi revelado que isolados de mesmo genótipo (#114) manifestam taxas de conversão distintas. No terceiro experimento, os cinco isolados de genótipo recombinante descritos acima, foram caracterizados fenotipicamente nos ensaios de invasão parasitária e proliferação intracelular. Em adicional, foi determinado o perfil dos genes ROP18 e ROP5 de dois isolados de genótipos distintos, TgPigBrAL01 (#114) e TgCkBrAL01 (#277). Os isolados de genótipo recombinantes exibiram baixa taxa de invasão e menor proliferação em relação às cepas RH e ME49, mas não apresentaram diferença entre si. Por fim, as características encontradas de baixa infectividade de dois isolados recombinantes corroboram com o padrão dos genes ROP5/ROP18 (padrão 1/3) que caracteriza um isolado avirulento ou não-letal no modelo murino. O emprego de técnicas de caracterização in vitro mostrou-se eficiente para determinar as características da infectividade que estão diretamente relacionadas com a virulência de T. gondii.", publisher = {Universidade Federal Rural de Pernambuco}, scholl = {Programa de Pós-Graduação em Biociência Animal}, note = {Departamento de Morfologia e Fisiologia Animal} }