@PHDTHESIS{ 2013:606141555, title = {Caracterização de um isolado de Yam mild mosaic virus (YMMV) obtido de Dioscorea trifida, sequenciamento do genoma e produção de antissoro policlonal}, year = {2013}, url = "http://www.tede2.ufrpe.br:8080/tede2/handle/tede2/6595", abstract = "O inhame (Dioscorea spp.) apresenta importante papel socioeconômico na região Nordeste do Brasil. Além de fornecer alimento de alto valor nutritivo para a dieta humana, é fonte de renda para famílias de baixo poder aquisitivo, empregando grande contingente de mão de obra. Dentre os problemas fitossanitários desta cultura, destacam-se as doenças fúngicas e aquelas causadas por nematoides. As viroses apresentam também elevada importância, principalmente por ocasionarem degenerescência de cultivares, com diminuição do vigor das plantas e, consequentemente perdas qualitativas e quantitativas da produção. Três vírus se destacam, em nível de Brasil, com registros nas principais cultivares empregadas no Nordeste, Yam mosaic virus (YMV) e Yam mild mosaic virus (YMMV), pertencentes ao gênero Potyvirus, família Potyviridae e um vírus do gênero Badnavirus, família Caulimoviridae. Recentemente, foram detectados mais dois vírus, pertencentes aos gêneros Begomovirus e Curtovirus, família Geminiviridae. No presente trabalho, inicialmente foram efetuadas a detecção e caracterização de um isolado de YMMV, obtido de D. trifida, por meio de análise eletromicroscópica, incluindo a visualização de inclusões citoplasmáticas típicas do gênero Potyvirus. Em seguida, foram realizados estudos moleculares com primers específicos para o YMMV em RT–PCR, seguido de RT–PCR com primers degenerados para vírus do gênero Potyvirus, clonagem do produto correspondente à capa proteica e análise filogenética, com os dados de sequências disponíveis no GenBank. Também foi realizado o sequenciamento do genoma completo de um isolado de YMMV e estudo detalhado da sequência de nucleotídeo, mediante amplificação do cDNA e clonagem em plasmídeos pGEM-T Easy e do pCR 4 Topo, cujos dados foram depositados no GenBank. A diagnose das fitoviroses pode ser efetuada por técnicas sorológicas e moleculares. Na cultura do inhame, usa-se, em geral, ferramentas moleculares, pela dificuldade na aquisição de antissoros específicos, o que encarece a identificação dos agentes virais. Antissoro policlonal para YMMV foi desenvolvido em coelho usando a proteína capsidial de um isolado do vírus expressa in vitro no sistema Escherichia coli.", publisher = {Universidade Federal Rural de Pernambuco}, scholl = {Programa de Pós-Graduação em Fitopatologia}, note = {Departamento de Agronomia} }