@PHDTHESIS{ 2010:1718658100, title = {Avaliação de espermatozoides ovinos criopreservados em Tris-gema acrescido de antioxidantes enzimáticos e não-enzimáticos}, year = {2010}, url = "http://www.tede2.ufrpe.br:8080/tede2/handle/tede2/5842", abstract = "Objetivou-se com este trabalho avaliar o efeito da adição dos antioxidantes superóxido dismutase (SOD), glutationa reduzida (GSH), catalase (CAT), vitamina E (Trolox), e a associação entre CAT e SOD ao diluente Tris-gema de congelação do sêmen ovino. Foram utilizados cinco reprodutores ovinos da raça Santa Inês, com histórico de fertilidade, sendo os ejaculados obtidos pelo método de vagina artificial. Os ejaculados foram avaliados e submetidos à formação do pool, diluído em Tris-gema e glicerol 5%, acrescido de antioxidantes de acordo com o experimento e o grupo experimental: Exp. 1 (G1= Controle; G2= 25 U/mL de SOD; G3= 50 U/mL de SOD; G4= 100 U/mL de SOD; G5= 2 mM de GSH; G6= 5 mM de GSH; G7= 7 mM de GSH) e Exp. 2 (G1= Controle; G2= 30 μM de Trolox; G3= 60 μM de Trolox; G4= 120 μM de Trolox; G5= 25 U/mL de CAT; G6= 50 U/mL de CAT; G7= 100 U/mL de CAT; G8= 25 U/mL de CAT + 100 U/mL de SOD), na concentração de 240 x 106 espermatozoides/mL. O sêmen foi acondicionado em palhetas (0,25 mL), congelado utilizando sistema automatizado e armazenado em nitrogênio líquido (- 196 ºC). Após descongelação (37 oC/30 segundos), as amostras foram submetidas à análise de integridade da membrana plasmática (iMP), acrossoma (iAc) e potencial de membrana mitocondrial (PMM) com sondas fluorescentes; cinética espermática, pelo CASA; e ultraestrutura dos espermatozoides, por microscopia eletrônica de transmissão. No Exp. 1, foi realizada avaliação in vivo, com o sêmen utilizado em programa de transferência de embriões. Diferenças significativas (P<0,05) foram observadas entre grupos para motilidade total (MT), retilinearidade (STR) e índice de oscilação (WOB), sendo o GSH 7mM inferior (P<0,05) na MT e superior na STR, e os grupos GSH 5 e 7 mM commaior (P<0,05) WOB em comparação ao controle, SOD 25 e 100 U/mL. Na análise ultraestrutural, evidenciou-se que o acrossoma foi melhor preservado (P<0,05), pós-congelação, nos grupos SOD 50 e 100 U/mL e GSH 2 e 5 mM, enquanto que o acrossoma e as mitocôndrias do grupo Controle, juntamente com o GSH 7 mM, sofreram maiores danos (P<0,05). Para a fertilização in vivo, o grupo SOD conferiu resultados numericamente superiores aos grupos controle e GSH. Para o Exp. 2, o CAT 100 U/mL apresentou menor porcentual (P<0,05) de espermatozoides com acrossoma íntegros. Diferenças significativas (P<0,05) foram observadas entre grupos na cinética espermática (motilidade progressiva, linearidade, retilinearidade, índice de oscilação, velocidade em linha reta e velocidade média do percurso), sendo superiores para os grupos Trolox 30 e 60 μM e inferiores para os grupos CAT 50 e 100 U/mL. Na avaliação ultraestrutural, os grupos CAT 50 e 100 U/mL apresentaram menor preservação (P<0,05) do acrossoma, enquanto o CAT 25 U/mL foi superior (P<0,05) ao CAT 100 U/mL para a preservação da membrana plasmática e o SOD 25 U/mL foi inferior (P<0,05) aos demais grupos na preservação da mitocôndria. Assim, conclui-se que a adição de GSH na concentração de 7mM e CAT 50 e 100 U/mL não preservam a integridade estrutural de espermatozoides ovinos pós-criopreservação; a adição de SOD 100 U/mL, Trolox 60 e 120 μM, e a associação de CAT 25 U/mL + SOD 100 U/mL proporcionam maior preservação das membranas de espermatozóides congelados de ovinos.", publisher = {Universidade Federal Rural de Pernambuco}, scholl = {Programa de Pós-Graduação em Ciência Veterinária}, note = {Departamento de Medicina Veterinária} }