@MASTERSTHESIS{ 2012:1749095557,
 	title = {Estudo molecular de pestivirus em amostras de cultura celular e soro de pequenos ruminantes},
 	year = {2012},
 	url = "http://www.tede2.ufrpe.br:8080/tede2/handle/tede2/5327",
 	abstract = "Em ruminantes as pestiviroses são frequentemente associadas a infecções subclínicas ou com sinais clínicos leves e passageiros, sendo as maiores perdas relacionadas com a infecção de fêmeas prenhes que podem causar perdas fetais e nascimento de animais persistentemente infectados (PI). Os Pestivirus estão distribuídos em muitos países, inclusive no Brasil, onde estudos em caprinos e ovinos são escassos. Vários estudos têm relatado a utilização de técnicas moleculares para a detecção de Pestivirus, dentre elas a RT-PCR e a RT-qPCR que são capazes de detectar animais PI, principal fonte de manutenção do vírus no rebanho. Objetivou-se com este estudo determinar o limite mínimo de detecção para Pestivirus a partir de sobrenadante de cultura celular e soro de pequenos ruminantes utilizando a RT-PCR e qRT-PCR. A extração dos ácidos nucléicos foi realizada com kit comercial QIAamp® MinElute® Virus Spin, a reação de transcriptase reversa seguiu o protocolo recomendado pelo fabricante da enzima transcriptase reversa M-MLV. A avaliação do limite de detecção da RT-qPCR e RT-PCR para Pestivirus foi realizada utilizando uma curva de calibração (fator de diluição 10) com TCID50/mL conhecidas e decrescentes utilizando primers denominados panpestivírus. O limite de detecção da RT-qPCR em sobrenadante de cultura celular foi de 10-3 TCID50/mL e da RT-PCR foi de 10-2 TCID50/mL, já o limite mínimo de detecção utilizando os soros capino, ovino e Gibco® Lamb como diluentes foram de 1 TCID50/mL. Os ensaios realizados nas condições descritas nesse estudo demonstraram ser sensíveis, podendo ser utilizados como uma estratégia de diagnóstico etiológico do Pestivirus, sobretudo para a identificação molecular de animas PI, o que é essencial para o controle das pestiviroses.",
 	publisher = {Universidade Federal Rural de Pernambuco},
 	scholl = {Programa de Pós-Graduação em Ciência Veterinária},
 	note = {Departamento de Medicina Veterinária}
}