@MASTERSTHESIS{ 2008:1825741073, title = {Avaliação in vitro e in vivo da adição de diluentes na refrigeração do sêmen de carneiros da Raça Dorper}, year = {2008}, url = "http://www.tede2.ufrpe.br:8080/tede2/handle/tede2/5284", abstract = "Neste estudo objetivou-se avaliar a viabilidade in vitro e in vivo das células espermáticas após a adição de diluente no processo de refrigeração do sêmen ovino, e na fertilização de oócitos após inseminação de fêmeas ovinas superovuladas. No Experimento I foram utilizados três ejaculados de cada um dos três reprodutores Dorper, coletados com vagina artificial a intervalo de 3 dias, em três repetições. As características macro e microscópicas do sêmen foram analisadas antes e após a formação de um pool, além da concentração espermática, integridade do DNA e do acrossoma. O pool foi dividido em cinco partes iguais, procedeu-se com a diluição (1:3, sêmen:diluente) para constituir os respectivos grupos de diluentes: Equimix (DI), Laiciphos Green Ovine (DII), FR 4 (DIII), Equimix-Gema – Equimix com 20% gema de ovo (DIV) e Tris-Gema (DV; controle). Cada grupo foi subdividido em quadruplicata, refrigerado e mantido a 4 °C até as avaliações (MIP, vigor, integridade do DNA e do acrossoma) correspondendo a 0, 12, 24, 36 e 48 horas. Nas avaliações in vitro do sêmen o DI apresentou maior queda de MIP às 12 h em relação aos demais grupos (p<0,05). Às 24 h os grupos DII, DIV e DV apresentaram a melhor MIP (p<0,05), não divergindo (p>0,05) entre si, enquanto que às 48 h o DII e o DV foram superiores (p<0.05) aos demais. Com relação ao vigor, os grupos DII e o DV apresentaram valores superiores (p<0,05) ao DI e DIII a partir das 12 horas e ao DIV a partir das 24 horas (p<0,05). Em todos os grupos de diluentes houve a preservação total da integridade do DNA e alto índice de espermatozóides com acrossoma intacto, para todos os intervalos avaliados.Para o Experimento II foi utilizada a mesma técnica para colheita e processamento dos ejaculados de três reprodutores Dorper. Formou-se um pool com três ejaculados de cada animal, dividiu-se em duas partes iguais diluídas na proporção 1:3 para constituir os respectivos grupos experimentais: Equimix-Gema (DI) e Tris-Gema (DII; controle). Cada grupo foi subdividido em outras duas alíquotas: fresco – F (F-DI e F-DII), que foi usado imediatamente, e refrigerado – R (R-DI e R-DII), mantido a 4 °C por 24 horas de armazenamento. Foram realizadas inseminações laparoscópicas, com volume inseminante de 0,25 mL por corno uterino, momento em que foram realizadas as avaliações dos ovários. Foram realizados 39 procedimentos de colheitas de embriões, em 19 foram utilizados sêmen refrigerado (R-DI e R-DII) e em 20 sêmen fresco (F-DI e F-DII). No teste in vivo obteve-se uma taxa geral de estruturas fertilizadas de 71,0% (237/334), sendo 59,3% (198/334) de embriões viáveis, o que não variou significativamente (p>0,05) entre os tipos de sêmen e de diluentes. No total dos embriões, 86,4% apresentaram qualidade de grau I e II, sendo o sêmen refrigerado do R-DI o de melhor percentual (100%) (p<0,05). O “status” ovariano no momento da inseminação interferiu na fertilização, observado-se melhores resultados para o sêmen fresco do F-DI quando o ovário se encontrava em ovulação. Para o F-DII, este status foi o que apresentou menor quantidade de estruturas fertilizadas (p<0,05). Ao final dos experimentos pode-se concluir que: o diluente Laiciphos Green Ovine, da mesma forma que o Tris-gema, pode ser utilizado na conservação do sêmen a 4 °C por 48 horas; enquanto o Equimix, acrescido de 20% de gema de ovo, recomenda-se que seja utilizado no armazenamento do sêmen (4 °C) por até 24 horas. É viável a refrigeração do sêmen ovino a 4°C por 24 horas para a utilização em programas de transferência de embriões; e que o diluidor Equimix, acrescido de 20% gema de ovo, resultou em taxa de fertilização e qualidade embrionária similares ao tradicional Tris-Gema.", publisher = {Universidade Federal Rural de Pernambuco}, scholl = {Programa de Pós-Graduação em Ciência Veterinária}, note = {Departamento de Medicina Veterinária} }