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Tipo do documento: Dissertação
Título: Influência do tempo na fertilidade do sêmen descongelado de garanhões da raça Quarto de Milha
Autor: BRANDÃO, Illanna de Souza Lima 
Primeiro orientador: CARNEIRO, Gustavo Ferrer
Primeiro membro da banca: NETTO MAIA, Victor
Segundo membro da banca: BAPTISTA FILHO, Luiz Carlos Fontes
Resumo: Quando se trata de biotecnologias da reprodução, é conhecido que o índice de fertilidade do sêmen congelado equino ainda é reduzido, uma vez que, os processos de congelação e descongelação levam a efeitos deletérios sobre o espermatozoide, diminuindo sua taxa de motilidade e vigor, modificando sua morfologia e, consequentemente, reduzindo o potencial fértil dos reprodutores. Por isso a necessidade de testes in vitro que avaliem a qualidade do sêmen equino descongelado, assim como sua viabilidade in vivo, levandose em consideração a possível influência da individualidade do animal sobre a forma de se comportar das células espermáticas frente aos processos de congelação e descongelação. Logo, o objetivo do presente estudo foi avaliar parâmetros de qualidade seminal in vitro de diferentes garanhões durante o teste de termorresistência, com o propósito de se obter uma técnica com maior repetibilidade, e que auxilie no incremento dos resultados no uso de sêmen congelado equino. Para isso, foram utilizadas amostras de sêmen de 4 garanhões da raça Quarto de Milha, em 5 repetições, submetidos a TTR nos tempos 0, 30, 60 e 90 minutos. A cinética espermática foi avaliada através do CASA. A integridade de membrana, foi avaliada pela coloração dupla (Diacetato de Carboxifluoresceína e Iodeto de Propídio), e a integridade do acrossoma, o Isotiocianeto de Fluoresceína conjugado a Peanut agglutin. A morfologia espermática foi analisada através de microscopia em câmara úmida com microscópio de contraste de fase. A viabilidade in vivo, foi testada pela inseminação de 10 éguas para gestação ou coleta de embriões distribuídos entre os reprodutores. Os dados foram analisados pelo Statistical Analysis System (SAS), com linearidade mista e parcelas repetidas no tempo, adotando covariância autorregressiva; e as médias comparadas pelo teste de Tukey Kramer. As correlações entre as variáveis foram avaliadas pelo coeficiente de correlação de Spearman. Foi observada uma interação significativa nos parâmetros Reprodutor, Tempo e interação reprodutor x tempo (p < 0,001) na cinética espermática, indicando individualidade entre garanhões em termos de longevidade espermática. Essa individualidade se repetiu na integridade de membrana, onde apenas um dos garanhões manteve membrana íntegra sem diferença significativa até os 90 minutos pós-TTR, enquanto que os demais reprodutores obtiveram diferença na integridade de membrana aos 30 e aos 60 minutos, respectivamente. Não houve diferença na patologia espermática ou na integridade de acrossoma entre tempos ou reprodutores. 50% das éguas inseminadas apresentaram embrião ou prenhez e todos as amostras seminais apresentaram pelo menos 1 égua prenhe ou embriões. Demonstrando nitidamente a individualidade dos reprodutores e a necessidade de mais conhecimento das características seminais de longevidade espermática dos mesmos, a fim de se padronizar protocolos de IA para poder determinar o momento mais adequado para a inseminação de acordo com o tempo da ovulação, mantendo-se índices de fertilidade melhores.
Abstract: When it comes to reproduction biotechnologies, it is known that the fertility index of equine frozen semen is still reduced, since the freezing and thawing processes lead to deleterious effects on the spermatozoon, decreasing its rate of motility and vigor, modifying its morphology and, consequently, reducing the reproductive potential of the breeders. Therefore, the need for in vitro tests to assess the quality of thawed equine semen, as well as its in vivo viability, taking into account the possible influence of the individuality of the animal on the way sperm cells behave in the face of freezing processes. and thawing. Therefore, the objective of the present study was to evaluate in vitro seminal quality parameters of different stallions during the thermoresistance test, with the purpose of obtaining a technique with greater repeatability, and that helps to increase the results in the use of equine frozen semen. For this, semen samples of 4 Quarter Horse stallions were used, in 5 repetitions, submitted to TTR at times 0, 30, 60 and 90 minutes. Sperm kinetics was evaluated using CASA. Membrane integrity was evaluated by double staining (Carboxyfluorescein Diacetate and Propidium Iodide), and acrosome integrity, Fluorescein Isothiocyanide conjugated to Peanut agglutin. Sperm morphology was analyzed by wet chamber microscopy with phase contrast microscope. In vivo viability was tested by inseminating 10 mares for pregnancy or collecting embryos distributed among the breeders. Data were analyzed using the Statistical Analysis System (SAS), with mixed linearity and plots repeated over time, adopting autoregressive covariance; and means compared by the Tukey Kramer test. Correlations between variables were assessed using Spearman's correlation coefficient. A significant interaction was observed in the parameters sire, time and sire x time interaction (p < 0.001) in sperm kinetics, indicating individuality among stallions in terms of sperm longevity. This individuality was repeated in membrane integrity, where only one of the stallions maintained an intact membrane without significant difference up to 90 minutes post-TTR, while the other stallions had differences in membrane integrity at 30 and 60 minutes, respectively. There was no difference in sperm pathology or acrosome integrity between times or sires. 50% of the inseminated mares had an embryo or pregnancy and all seminal samples had at least 1 pregnant mare or embryos. Clearly demonstrating the individuality of the breeders and the need for more knowledge of their seminal characteristics of sperm longevity, in order to standardize AI protocols in order to determine the most appropriate moment for insemination according to the time of ovulation, keeping better fertility rates.
Palavras-chave: Equino
Criopreservação
Longevidade espermática
Semen
Área(s) do CNPq: CIENCIAS AGRARIAS::MEDICINA VETERINARIA
Idioma: por
País: Brasil
Instituição: Universidade Federal Rural de Pernambuco
Sigla da instituição: UFRPE
Departamento: Departamento de Morfologia e Fisiologia Animal
Programa: Programa de Pós-Graduação em Ciência Animal Tropical
Citação: BRANDÃO, Illanna de Souza Lima. Influência do tempo na fertilidade do sêmen descongelado de garanhões da raça Quarto de Milha. 2020. 74 f. Dissertação (Programa de Pós-Graduação em Ciência Animal Tropical) - Universidade Federal Rural de Pernambuco, Recife.
Tipo de acesso: Acesso Aberto
URI: http://www.tede2.ufrpe.br:8080/tede2/handle/tede2/8810
Data de defesa: 31-Aug-2020
Appears in Collections:Mestrado em Ciência Animal Tropical

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