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Tipo do documento: Tese
Título: Estudo fitoquímico, obtenção de nanopartículas de prata por síntese verde a partir de Jatropha mollissima (Euphorbiaceae) e avaliação das atividades antimicrobiana e citotóxica
Autor: CAVALCANTE, Noelly Bastos 
Primeiro orientador: ALMEIDA, Jackson Roberto Guedes da Silva
Primeiro membro da banca: QUEIROZ, Mário Adriano Ávila
Segundo membro da banca: LORENZO, Vitor Prates
Terceiro membro da banca: ARAÚJO, Edigênia Cavalcante da Cruz
Quarto membro da banca: ROLIM, Larissa Araújo
Resumo: Jatropha mollissima é uma planta arbustiva da família Euphorbiaceae, endêmica do bioma Caatinga. É uma espécie que pouco se tem referência, no entanto é utilizada na medicina popular principalmente para o tratamento de úlceras e picadas de cobra. Os objetivos principais deste trabalho foram: realizar o estudo fitoquímico de J. mollissima, obter nanopartículas de prata por síntese verde utilizando seu extrato aquoso e avaliar sua capacidade antibacteriana e citotóxica. Neste trabalho foi relatado pela primeira vez o extrato aquoso de J. mollissima como redutor de íons prata. O material vegetal (folhas) foi coletado no município de São Raimundo Nonato-PI, em época chuvosa e, após o processo de secagem e maceração do material, foi obtido o extrato etanólico bruto (Jm-EEB). Após esse procedimento, o Jm-EEB foi particionado utilizando o método de cromatografia líquida a vácuo com solventes em ordem crescente de polaridade, obtendo-se as fases hexânica (Jm-Hex), clorofórmica (Jm-CHCl3), acetato de etila (Jm-AcOEt) e metanólica (Jm-MeOH). O extrato aquoso para a biossíntese de nanopartículas de prata, por sua vez, foi obtido utilizando 10 g do pó das folhas imersos em água bidestilada, sendo a mistura, em seguida, submetida à fervura por dez minutos. O material foi centrifugado, filtrado e armazenado a 4 °C. O extrato bruto e as fases foram submetidos à análise por CG-EM para a identificação dos seus constituintes químicos. As fases clorofórmica e acetato de etila foram submetidas ao fracionamento por cromatografia líquida em coluna utilizando os solventes hexano, clorofórmio, acetato de etila e metanol individualmente ou em misturas binárias. Além disso, todos os extratos foram submetidos aos testes biológicos de atividade antimicrobiana (CIM e da CBM) e atividade citotóxica, para determinação da CI50 frente a três linhagens de células tumorais. O fracionamento cromatográfico possibilitou o isolamento de duas substâncias que, após submetidas a análises por RMN de 13C e 1H uni e bidimensionais, foram identificadas como triacontanol e β-sitosterol. As análises por CG-EM revelaram a presença de 51 picos para Jm-EEB, 24 picos para Jm-Hex, 60 picos para Jm-CHCl3, 36 picos para Jm-AcOEt e 16 picos para Jm-MeOH, sendo os compostos da classe dos terpenos os mais representativos. Foram identificados diversos constituintes, tais como fitol, lupeol, ácido palmítico, ácido linolênico e α-tocoferol, todos com atividades biológicas importantes relatadas na literatura. Também foram realizadas análises por CLAE-MS/MS e aplicação de networking molecular, tornando possível a identificação de oito flavonoides descritos pela primeira vez na espécie. No teste de atividade antimicrobiana, J. mollissima foi capaz de promover uma inibição moderada de espécies bacterianas de importância clínica, sendo Serratia marcescens a espécie mais sensível. Nos testes de atividade modulatória com antibióticos, ficou evidenciado que J. mollissima estabeleceu uma relação antagônica com o antibiótico Norfloxacina, que faz parte da classe das fluoroquinolonas. As nanopartículas de prata obtidas por síntese verde, por sua vez, obtiveram atividade antibacteriana significativa contra todas as cepas testadas. Com relação à atividade citotóxica, J. mollissima apresentou um forte potencial antiproliferativo, principalmente contra linhagens celulares de câncer de próstata (CI50 < 30 μg/mL). O mesmo pôde ser observado para as nanopartículas de prata biossintetizadas, cuja melhor CI50 foi 2,93 μg/mL, também contra a linhagem de câncer de próstata. Estes resultados são inéditos para a espécie, o que incentiva ainda mais os estudos com esta planta, a fim de elucidar possíveis mecanismos de ação.
Abstract: Jatropha mollissima is a shrubby plant of the Euphorbiaceae family, endemic to the Caatinga biome. It is a species that has little reference, however it is used in folk medicine mainly for the treatment of ulcers and snake bites. The main objectives of this work were: to perform the phytochemical study of J. mollissima, to obtain silver nanoparticles by green synthesis using its aqueous extract and to evaluate its antibacterial and cytotoxic capacity. In this work the aqueous extract of J. mollissima was reported for the first time as a silver ion reducer. The plant material (leaves) was collected in the city São Raimundo Nonato-PI, in the rainy season and, after the drying and maceration of the material, crude ethanol extract (Jm-CEE) was obtained. After this procedure, the Jm-CEE was partitioned using the vacuum liquid chromatography method with solvents in increasing order of polarity, obtaining the hexane (Jm-Hex), chloroform (Jm-CHCl3), ethyl acetate (Jm-AcOEt) and methanol (Jm-MeOH). The aqueous extract for biosynthesis of silver nanoparticles, in turn, was obtained using 10 g of the powder of the leaves immersed in doubly distilled water, the mixture being then boiled for ten minutes. The material was centrifuged, filtered and stored at 4 °C. The crude extract and phases were submitted to GC-MS analysis for the identification of their chemical constituents. The chloroform and ethyl acetate phases were subjected to fractionation by column liquid chromatography using the solvents hexane, chloroform, ethyl acetate and methanol individually or in binary mixtures. In addition, all extracts were submitted to biological tests of antimicrobial activity (MIC and MBC) and cytotoxic activity, to determine the IC50 against the three tumor cell lines. The chromatographic fractionation allowed the isolation of two substances that, after being subjected to the uni and bidimensional 13C and 1H NMR analyzes, were identified as triacontanol and β-sitosterol. GC-MS analyzes revealed the presence of 51 peaks for Jm-CEE, 24 peaks for Jm-Hex, 60 peaks for Jm-CHCl3, 36 peaks for Jm-AcOEt and 16 peaks for Jm-MeOH, the compounds of class of the most representative terpenes. Several constituents were identified, such as phytol, lupeol, palmitic acid, linolenic acid and α-tocopherol, all with important biological activities reported in the literature. Analyzes by HPLC-DAD-IT-MS / MS and molecular networking application were also performed, making it possible to identify eight flavonoids described for the first time in this species. In the antimicrobial activity test, J. mollissima was able to promote a moderate inhibition of bacterial species of clinical importance, being Serratia marcescens the most sensitive species. In the tests of modulatory activity with antibiotics, it was evidenced that J. mollissima established an antagonistic relation with the antibiotic Norfloxacina, that is part of the class of fluoroquinolonas. The silver nanoparticles obtained by green synthesis, in turn, obtained significant antibacterial activity against all strains tested. Regarding the cytotoxic activity, J. mollissima showed a strong antiproliferative potential, mainly against prostate cancer cell lines (IC50 < 30 μg/mL). The same could be observed for the biosynthesized silver nanoparticles, whose best IC50 was 2.93 μg/mL, also against the prostate cancer lineage. These results are unprecedented for the species, which further encourages studies with this plant, in order to elucidate possible mechanisms of action.
Palavras-chave: Jatropha mollissima
Fitoquímica
Nanopartícula de prata
Síntese verde
Atividade antibacteriana
Atividade citotóxica
Área(s) do CNPq: OUTROS::CIENCIAS
Idioma: por
País: Brasil
Instituição: Universidade Federal Rural de Pernambuco
Sigla da instituição: UFRPE
Departamento: Rede Nordeste de Biotecnologia
Programa: Programa de Pós-Graduação em Biotecnologia (Renorbio)
Citação: CAVALCANTE, Noelly Bastos. Estudo fitoquímico, obtenção de nanopartículas de prata por síntese verde a partir de Jatropha mollissima (Euphorbiaceae) e avaliação das atividades antimicrobiana e citotóxica. 2019. 189 f. Tese (Programa de Pós-Graduação em Biotecnologia (Renorbio)) - Universidade Federal Rural de Pernambuco, Recife.
Tipo de acesso: Acesso Aberto
URI: http://www.tede2.ufrpe.br:8080/tede2/handle/tede2/8168
Data de defesa: 4-Jun-2019
Aparece nas coleções:Doutorado em Biotecnologia

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