@MASTERSTHESIS{ 2021:866478054,
 	title = {Caracterização do groundnut ringspot orthotospovirus (GRSV) em áreas produtoras de melancia do Rio Grande Norte e Ceará},
 	year = {2021},
 	url = "http://www.tede2.ufrpe.br:8080/tede2/handle/tede2/9397",
 	abstract = "A melancia (Citrullus lanatus) é cultivada em países como China, Turquia, Irã e Brasil. Viroses ocasionadas por espécies como, por exemplo, Cucumber mosaic virus (CMV), Watermelon mosaic virus (WMV) e Zucchini yellow mosaic virus são consideradas economicamente importantes para a cultura. No ano de 2015 o orthotospovírus da mancha anelar do amendoim (GRSV) foi relatado pela primeira vez na cultura da melancia, afetando campos produtivos no estado de São Paulo. Em 2020, sintomas semelhantes à virose em melancia foram encontrados em campos produtivos do estado do Rio Grande do Norte – Mossoró e Ceará, Brasil. Diante disso, o presente trabalho teve por objetivo realizar o diagnóstico, a caracterização biológica e molecular de GRSV e verificar a presença de outros possíveis vírus na cultura de melancia na região produtora. Para tanto, duas coletas foram realizadas: uma em janeiro de 2020 (96 amostras) e outra em janeiro de 2021 (33 amostras), representando um total de 129 amostras foliares. As amostras coletadas foram submetidas aos seguintes Enzyme - Linked Immunosorbent testes sorológicos: Nitrocelulose imunoenzimática (Dot-ELISA) e Assay (ELISA) usando os anticorpos anti-GRSV (0781-DSMZ, Alemanha), anti-potyvírus (0573/1-DSMZ) e anti-TSWV (0106/3-DSMZ). Em seguida, plantas de Nicotiana Benthamiana foram inoculadas com o isolado viral coletado, onde amostras sintomáticas foram posteriormente secas a 4° C e encaminhadas ao Leibniz Institute - DSMZ para extração de RNA total e sequenciamento por alto desempenho (HTS) pela plataforma Illumina Nextera (1-2Gb, 2x301 bp). A caracterização biológica foi realizada através do estudo da gama de hospedeiros com as seguintes espécies: N. benthamiana, Nicandra physalodes, Physalis florida, Capsicum baccatum, Capsicum annuum, Solanum lycopersicum – Solanaceae e Citrullus lanatus, Cucumis anguria, Cucumis sativus - Cucurbitaceae. Cada espécie de planta foi avaliada em experimentos com dez repetições. Para a análise molecular, oligonucleotídeos específicos foram desenhados e usados na RT-PCR. Com a biblioteca de reads gerada através do HTS foi possível montar as sequências correspondentes aos segmentos S (3039 nt), M (4857 nt) e L (8882 nt) de GRSV_RN. Análises por Blastn utilizando as sequências nucleotídicas dos segmentos S, M e L revelaram altas identidades de 98,94%, 98,45%, 98,86%, respectivamente com sequências do isolados de GRSV do Piauí disposto no NCBI (MK503848, MK503850, MK503849). Vinte e seis amostras foliares de melancia da coleta realizada em janeiro de 2021 (segunda coleta) foram testadas via ACP-ELISA contra GRSV e potyvirus, das quais 12 foram positivas para infecção de ambos os vírus, caracterizando a ocorrência de infecção mista. O DAS-ELISA (anti-TSWV) revelou que 14 de 28 plantas de melancia foram positivas para TSWV. As amostras de melancia (Crimson sweet) (6), N. benthamiana (1) e N. physalodes (1) testaram positivo via RT-PCR para GRSV. Em relação aos resultados do estudo da gama de hospedeiros, as espécies N. benthamiana; N. physalodes; C. annuum; S. lycopersicum; P. florida e C. lanatus foram suscetíveis ao GRSV, confirmado por testes de Dot - ELISA. Além disso, as análises de recombinação não indicaram sinal de recombinação significativa com as sequências de GRSV. Com base nos resultados obtidos nesse estudo verificou-se que o GRSV_RN infecta os campos de melancia em Mossoró e Ceará, e que provavelmente infecção mista com outras espécies virais pode contribuir para os sintomas observados em campo.",
 	publisher = {Universidade Federal Rural de Pernambuco},
 	scholl = {Programa de Pós-Graduação em Fitopatologia},
 	note = {Departamento de Agronomia}
}