1. TEDE2
  2. UFRPE. Unidade Acadêmica de Garanhuns
  3. PPG em Sanidade e Reprodução de Ruminantes
  4. Mestrado em Sanidade e Reprodução de Ruminantes
Exportar este item: EndNote BibTex

Use este identificador para citar ou linkar para este item: http://www.tede2.ufrpe.br:8080/tede2/handle/tede2/8032
Registro completo de metadados
Campo DCValorIdioma
dc.creatorOLIVEIRA, Aline Saraiva de-
dc.creator.Latteshttp://lattes.cnpq.br/5789981956851043por
dc.contributor.advisor1GUERRA, Maria Madalena Pessoa-
dc.contributor.advisor-co1CÂMARA, Diogo Ribeiro-
dc.contributor.referee1CÂMARA, Diogo Ribeiro-
dc.contributor.referee2BATISTA, André Mariano-
dc.contributor.referee3SILVA, Ellen Cordeiro Bento da-
dc.date.accessioned2019-05-21T13:00:41Z-
dc.date.issued2018-03-01-
dc.identifier.citationOLIVEIRA, Aline Saraiva de. Localização da NA+, K+-ATPase em espermatozoides ovino in natura, pós-descongelação e capacitados in vitro e determinação dos efeitos de seu bloqueio sobre as características espermáticas. 2018. 77 f. Dissertação (Programa de Pós-Graduação em Sanidade e Reprodução de Ruminantes) - Universidade Federal Rural de Pernambuco, Garanhuns.por
dc.identifier.urihttp://www.tede2.ufrpe.br:8080/tede2/handle/tede2/8032-
dc.description.resumoObjetivando-se localizar a Na+, K+-ATPase em espermatozoides ovinos (in natura, pós decongelação e capacitados in vitro), assim como avaliar a influência da adição da ouabaína sobre os parâmetros cinemáticos espermáticos, foram realizados dois experimentos. Exp.1: amostras de sêmen (quatro carneiros, sete repetições) foram colhidas, diluídas (Tris-gema, concentração final de 200 x 106 espermatozoides/mL) e congeladas à -196 C°. Exp. 2: amostras seminais de quatro ovinos (cinco repetições) foram diluídas em meio TALPm (50 x106 espermatozoides/mL) e aliquotadas em dois grupos: parte destinada a capacitação in vitro (adição de 2,5% de soro de ovelha em estro - SOE) ou com adição de ouabaína (10-4 M), visando o bloqueio da Na+,K+-ATPase. Alíquotas de sêmen de ambos os experimentos foram avaliadas pelo sistema CASA para análise dos parâmetros de cinemética espermática, e por meio da citometria de fluxo, para a localização da Na+, K+-ATPase (Bodipy FL Ouabaína), análise da integridade de membrana plasmática (IP) e acrossomal (FITC-PNA), viabilidade e estabilidade de membrana plasmática (YO-PRO e M540). No Exp. 2, além das análises supracitadas realizou-se também a avaliação do potencial de membrana mitocondrial (JC-1). Para o Exp. 2, todas as análises foram efetudas após 0h e 3h de incubação a 36 °C. Os resultados obtidos foram: 1) a Na+, K+-ATPase foi localizada na peça intermediária dos espermatozoides independente do status da amostra (in natura, pós descongelação e capacitados); 2) o processo de congelação/descongelação resultou em uma diminuição (P<0,05) nos parâmetros de MT, MP e VAP, um aumento no BCF, além de redução (P<0,05) no percentual de células apresentando marcação com Bodipy FL Ouabaína, com membranas plasmáticas e acrossomal íntegras, e percentagem de células com membrana plasmática estabilizada; 3) A longo do período de incubação, o bloqueio da Na+, K+-ATPase resultou na redução (P<0,05) da MP, VCL e VSL, enquanto no grupo controle observou-se redução (P <0,05) dos parâmetros MT, VCL e ALH; 4) A adição do SOE ao meio de TALPm resultou em redução (P<0,05) em MP, VCL e ALH, enquanto no grupo controle reduziu (P<0,05) os valores de MT e MP, não havendo diferença entre tratamentos para os parâmentros cinemáticos. Além disso, independentemente dos tratamentos, observou-se ao longo da incubação elevação (P<0,05) no percentual de células apresentando membrana plasmática lesionadas, acrossomal íntegra sem marcação da Na+, K+-ATPase. Em conclusão, independente do status fisiológico, a Na+, K+-ATPase não alterou sua localização, permanecendo na peça intermediária dos espermatozoides ovinos, e que, sua inibição não influenciou sobre os parâmetros de motilidade espermática.por
dc.description.abstractAiming to localize the Na+, K+-ATPase in ram sperm (raw, post-thaw and capacitated in vitro), and to evaluate the influience of ouabain addition on kinematic sperm parameters, two experiments were performed. Exp.1: semen samples (four rams, seven replicates) were harvested, diluted (Tris-gema, final concentration 200 x 106 sperm/mL) and frozen at -196 C°. Exp. 2: sêmen samples from four rams (five replicates) were diluted in TALPm (50 x106 sperm/mL) and aliquot for two precedures: in vitro capacitation (addition of 2,5% of estrous sheep serum - ESS) or ouabain addition (10-4 M), in order to block the Na+,K+-ATPase. Semen aliquots from both experiments were evaluated using CASA system for kinematic parameters and with aid of flow cytometry it was determined localization of Na+, K+-ATPase (Bodipy FL Ouabaína), evaluated plasmatic (IP) and acrosomal membrande (FITC-PNA) integrity, viability and stability of sperm plasma membrane (YO-PRO e M540). During Exp. 2, it was also evaluated the mitochondrial membrane potential (JC-1). For Exp. 2, all analysis were performed at 0h and 3h of incubation time (36 °C). These are the results: 1) The Na+, K+-ATPase was localized on middle piece of sperm flagellum, despite sample status (raw, post-thaw and capacitated); 2) the freezing-thawing proccess reduced (P<0,05) MT, MP and VAP and increased BCF. There was also a reduction (P<0.05) on percentage of sperm stained with Bodipy FL Ouabain, with intact plasmatic and acrossomal membranes, and percentage of sperm with stabilized plasma membrane; 3) Throught incubation time, the Na+, K+-ATPase blocking reduced (P<0.05) MP, VCL and VSL, whereas on control group reduced (P <0.05) MT, VCL and ALH; 4) The addition of ESS to TALPm reduced (P<0.05) MP, VCL and ALH, and on control group reduced (P<0.05) MT and MP, with no difference between treatments for kinematic parameters. Therefore, despite of treatment, there was an increasing (P<0.05) on percentage of sperm with damages plasma membrane, intact acrosome and no stain for Na+, K+-ATPase. In conclusion, despit of sperm phisiological status, Na+, K+-ATPase ramains on middle piece of ram sperm flagellum and its inhibition have no influence on sperm motility parameters.eng
dc.description.provenanceSubmitted by Mario BC (mario@bc.ufrpe.br) on 2019-05-21T13:00:41Z No. of bitstreams: 1 Aline Saraiva de Oliveira.pdf: 952124 bytes, checksum: 62b016e88a0f2cc16e274bac13ed9f25 (MD5)eng
dc.description.provenanceMade available in DSpace on 2019-05-21T13:00:41Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Aline Saraiva de Oliveira.pdf: 952124 bytes, checksum: 62b016e88a0f2cc16e274bac13ed9f25 (MD5) Previous issue date: 2018-03-01eng
dc.formatapplication/pdf*
dc.languageporpor
dc.publisherUniversidade Federal Rural de Pernambucopor
dc.publisher.departmentUnidade Acadêmica de Garanhunspor
dc.publisher.countryBrasilpor
dc.publisher.initialsUFRPEpor
dc.publisher.programPrograma de Pós-Graduação em Sanidade e Reprodução de Ruminantespor
dc.rightsAcesso Abertopor
dc.subjectOvinopor
dc.subjectSêmenpor
dc.subjectBomba de sódiopor
dc.subject.cnpqMEDICINA VETERINARIA::REPRODUCAO ANIMALpor
dc.titleLocalização da NA+, K+-ATPase em espermatozoides ovino in natura, pós-descongelação e capacitados in vitro e determinação dos efeitos de seu bloqueio sobre as características espermáticaspor
dc.typeDissertaçãopor
Aparece nas coleções:Mestrado em Sanidade e Reprodução de Ruminantes

Arquivos associados a este item:
Arquivo Descrição TamanhoFormato 
Aline Saraiva de Oliveira.pdfDocumento principal929,81 kBAdobe PDFBaixar/Abrir Pré-Visualizar
Mostrar registro simples do item Recomendar este item Visualizar estatísticas


Os itens no repositório estão protegidos por copyright, com todos os direitos reservados, salvo quando é indicado o contrário.