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Tipo do documento: Tese
Título: Efeito de infusões intravenosas e intramamárias de lipopolissacarídeo (LPS) sobre parâmetros inflamatórios, reprodutivos e metabólicos em novilhas e vacas da raça holandesa
Autor: FERNANDES, Artur Cezar de Carvalho 
Primeiro orientador: MELO, Lúcio Esmeraldo Honório de
Primeiro coorientador: CERRI, Luis Ronaldo Aoki
Primeiro membro da banca: BARTOLOMEU, Cláudio Coutinho
Segundo membro da banca: RIZZO, Huber
Terceiro membro da banca: LIMA, Paulo Fernandes de
Quarto membro da banca: NASCIMENTO, Júlio Cézar dos Santos
Resumo: Objetivou-se avaliar os efeitos da resposta inflamatória na expressão gênica endometrial e no metabolismo energético em novilhas e vacas. Inicialmente, foi estabelecido um protocolo para indução de um perfil pró-inflamatório sistêmico, com base em múltiplas infusões de LPS. Posteriormente, 22 novilhas foram sincronizadas, inseminadas (D0) e divididas em grupo controle (sol. salina) e LPS, iniciando as infusões no D2. O grupo LPS recebeu infusões intravenosas (IV) de solução salina + LPS (0,1; 0,25; 0,5; 0,75; 1,0; 1,25 mg/Kg). Além da avaliação da temperatura retal, foram analisadas as concentrações plasmáticas de TNF-α, haptoglobina (Hp), progesterona, AGNE, e BHB, além das avaliações leucométricas. No D15, foram realizadas as biópsias endometriais, e posterior análise por qRT-PCR de genes relacionados ao adesão celular, sistema imunológico e desenvolvimento embrionário. As infusões de LPS estabeleceram um perfil próinflamatório caracterizado pelo aumento da temperatura (P<0,05), dos níveis de TNF-α (P=0,05) e de Hp (P<0,01), além de alteração na contagem diferencial de leucócitos. Não foi observada alteração nos parâmetros metabólicos. Em relação ao grupo controle, o grupo LPS apresentou menor expressão de IDO (P=0,04; fold=0,48) e PTX3 (P=0,01; fold=0,38), e uma expressão elevada de MX1 (P=0,02; fold=2,85). Em um segundo trabalho, para avaliar a influência da resposta inflamatória sobre o metabolismo energético de vacas em lactação, 20 vacas foram divididas em grupos controle (10 mL sol. Salina) e LPS (25 μg LPS/10 mL sol. salina). Foi avaliada a contagem de células somáticas (CCS), a produção leiteira, temperatura reticular, além dos níveis sorológicos de Hp, TNF-α, AGNE e BHB. No grupo LPS foi observado o aumento da CCS (P<0,0001), queda da produção (P<0,05), além do aumento da temperatura reticular (P<0,005) e aumento da concentração da Hp (P<0,0001). Verificou-se aumento de AGNE no dia nove e de BHB nos dias nove (P<0,005) e 10 (P=0,05). Com a realização dos presentes trabalhaos conclui-se inicialmente o protocolo utilizado no primeiro trabalho induziu um marcante perfil próinflamatório, porém, com limitado efeito na expressão do gene relacionados ao sistema imunitário, o que sugere uma possível explicação para a sub-fertilidade relacionadas a alterações fisiopatológicas em vacas leiteiras. Adicionalemnte, considerando a resposta inflamatória induzida pelo LPS intramamário, foi possível observar evidências da relação da resposta inflamatória com o metabolismo energético de vacas em lactação, e reafirmar a participação de mediadores inflamatórios na fisiopatogenia de enfermidades metabólicas em vacas de leite.
Abstract: The aim of the study was to evaluate the effects of the inflammatory response over endometrial gene expression and energy metabolism in heifers and cows. Initially, a protocol to induce a systemic pro-inflammatory profile was established based on multiple LPS infusions. Subsequently, 22 heifers were synchronized, inseminated (D0) and divided into control group (Saline sol.) and LPS, infusions started on D2. LPS group received intravenous infusions (IV) with saline solution + LPS (0.1; 0.25; 0.5; 0.75; 1.0; 1.25 mg / kg). Were analyzed the rectal temperature, plasma concentrations of TNF-α, haptoglobin (Hp), progesterone, AGNE and BHB, beside leucometrics analysis. On D15, the endometrial biopsies were performed, and subsequent analysis by qRT-PCR of genes related to cell adhesion, immune system and embryonic development. LPS infusions established a pro-inflammatory profile characterized by increase of temperature (P<0.05), TNF-α (P=0.05) and Hp (P<0.01), and effects on the differential leukocyte count. There was no change in metabolic parameters. The LPS group showed lower expression of IDO (P=0.04; fold=0.48) and PTX3 (P=0.01; fold=0.38), and high expression of MX1 (P=0.02; fold=2.85). Was concluded that the induced pro-inflammatory profile showed a strong but limited effect on gene expression related to immune system, suggesting a possible explanation for sub-fertility related pathophysiological changes in dairy cows. In the second study, to evaluate the influence of the inflammatory response on the energy metabolism of dairy cows, 20 cows were divided into control group (10 mL saline sol.) and LPS (25 ug LPS/10ml saline sol.). Was evaluated the somatic cell count, milk production, reticular temperature, as well the serum levels of Hp, TNF-α, AGNE and BHB. In LPS group was observed increased SCC (P<0.0001), decrease of production (P<0.05), and increased reticular temperature (P<0.005), as well an increase of Hp concentration (P<0,0001). Was observed increase on AGNE on day nine and BHB on day nine (P<0.005) and ten (P=0,05). Was concluded that the induced pro-inflammatory profile showed a strong but limited effect on gene expression related to immune system, suggesting a possible explanation for sub-fertility related pathophysiological changes in dairy cows. Aditonally, considering the inflammatory response induced by LPS intramammary infusions, were observed evidences of the relationship of the inflammatory response with the energy metabolism of dairy cows, and reaffirmed the participation of inflammatory mediators in the pathogenesis of metabolic diseases in dairy cows.
Palavras-chave: Inflamação
Gene endometrial
Metabolismo energético
Lipopolissacarídeo
Bovino
Área(s) do CNPq: CIENCIAS AGRARIAS::MEDICINA VETERINARIA
Idioma: por
País: Brasil
Instituição: Universidade Federal Rural de Pernambuco
Sigla da instituição: UFRPE
Departamento: Departamento de Medicina Veterinária
Programa: Programa de Pós-Graduação em Ciência Veterinária
Citação: FERNANDES, Artur Cezar de Carvalho. Efeito de infusões intravenosas e intramamárias de lipopolissacarídeo (LPS) sobre parâmetros inflamatórios, reprodutivos e metabólicos em novilhas e vacas da raça holandesa. 2016. 149 f. Tese (Programa de Pós-Graduação em Ciência Veterinária) - Universidade Federal Rural de Pernambuco, Recife.
Tipo de acesso: Acesso Aberto
URI: http://www.tede2.ufrpe.br:8080/tede2/handle/tede2/7162
Data de defesa: 24-Fev-2016
Aparece nas coleções:Doutorado em Ciência Veterinária

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